久草久草在线新免费,久久无码AV一区二区三区电影网,国内精品无码一区二区三区的AV,亚洲综合伊人视频播放

做液相色譜分析時，讓人頭疼的莫過于儀器突然 “鬧脾氣”—— 壓力莫名飆升、峰形變得亂七八糟、保留時間忽前忽后…… 遇到這些情況，十有八九是色譜柱堵了。別慌，掌握一套實用的排查和疏通方法，就能讓您的色譜柱 “起死回生”，還能延長它的使用壽命，幫實驗室省下不少成本。

一、先判斷：色譜柱是不是真堵了？

要解決問題，先得確認問題。當液相色譜儀出現這些 “異常信號” 時，您就得警惕色譜柱可能堵了：

壓力異常升高：這是明顯的信號。系統壓力比方法剛建立時高了不少，或者在短時間內一個勁地往上竄。

峰形異常：色譜峰變得不規整，出現分叉、拖尾、前沿的情況，峰面積也明顯變小，分離效果大不如前。

保留時間漂移：目標化合物的保留時間不穩定，變化很明顯。

壓力波動劇烈：就算不進樣，系統壓力也忽高忽低，很不穩定。

二、再定位：堵的是柱子還是其他地方？

發現壓力高，可別一股腦兒就怪色譜柱，系統其他地方也可能出問題。用一個簡單的 “斷開法” 就能找到問題所在：

斷開色譜柱：把色譜柱從流路里取下來，用兩通或者短路接頭把泵和檢測器連起來。

運行方法：按照相同的流速沖洗系統。

觀察壓力：

如果壓力還是很高，說明堵塞的地方在色譜柱之前，可能是過濾白頭、保護柱、在線過濾器或者管路，得一個個排查清洗或更換。

如果壓力恢復正常，那問題大概率出在色譜柱本身或者保護柱上。這時候可以先試試更換或卸下保護柱再測試，要是壓力正常，就是保護柱臟了；要是壓力還是高，那就是色譜柱堵了。

三、實戰疏通：四步搞定色譜柱堵塞

確定是色譜柱堵塞后，清洗要遵循 “從溫和到強力” 的原則，千萬別一開始就用強溶劑和高流速，不然可能會對柱子造成二次傷害。

第一步：反向沖洗（常用也有效）

大部分色譜柱是允許反沖的（但一定要看說明書確認）。把色譜柱的入口和出口調換連接，用合適的流動相反向沖洗，能把堵在柱頭的顆粒污染物沖出來。

注意：有些特殊鍵合相的柱子，比如某些糖分析柱，不建議反沖，操作前一定要查閱說明書。

第二步：梯度清洗（針對強保留污染物）

根據污染物的性質，比如脂類、蛋白質、疏水性強的物質等，選擇不同的清洗溶劑序列。清洗前一定要確保所用溶劑和當前流動相互溶，防止鹽析出來！

推薦一個清洗流程：

先用純水（或 95% 水 + 5% 有機相）以 0.2-0.5 mL/min 的低速沖洗 30 倍柱體積，把緩沖鹽去掉。

再用強溶劑（如乙腈或甲醇）低速沖洗 30 倍柱體積。

針對有機污染物：按照乙腈→異丙醇→二氯甲烷（或氯仿，要確認柱子是否兼容）→異丙醇→乙腈的順序，每種溶劑低速沖洗 20-30 倍柱體積。

針對蛋白質 / 生物樣品：可以用 0.1% TFA 水溶液→乙腈→異丙醇的序列清洗。

后用初始流動相平衡色譜柱。

第三步：更換篩板 / 再生

如果清洗后效果不好，可能是柱頭篩板堵得太嚴重了。有經驗的用戶可以在廠家指導下試試更換柱頭篩板，但這有一定風險，可能會破壞柱床。要是柱子很貴重，也可以聯系廠家進行專業的再生維護。

第四步：后的嘗試

如果所有方法都沒用，而且柱子過了保修期、價值不高，那可以試試卸下柱頭，用軟布蘸著溶劑輕輕擦頂端篩板，或者用極細的針頭輕輕疏通。這個操作風險很高，很容易損壞柱子，只能作為后的嘗試。

四、日常維護：預防堵塞更重要

其實，90% 的堵塞問題都能通過良好的操作習慣來避免，做好日常維護比出了問題再解決要省事得多：

一定要用保護柱：保護柱就像色譜柱的 “金鐘罩”，能有效攔住顆粒物和強保留物質，性價比很高。

做好樣品前處理：樣品必須用 0.22 μm 或 0.45 μm 的濾膜過濾，把微小顆粒徹底去掉。

妥善處理流動相：所有流動相，特別是水相和緩沖鹽，必須用高純試劑，還要經過抽濾脫氣。緩沖液好現配現用，防止長菌。

正確過渡流動相：方法結束后，如果用了緩沖鹽，必須先用高比例水相（>10%）沖洗至少 30 分鐘，把鹽分徹底沖干凈，再過渡到有機相保存，絕對不能把色譜柱長時間放在緩沖鹽溶液里。

操作要溫柔：避免流速和壓力劇烈變化，遵守色譜柱的 pH 和壓力限值。

色譜柱是液相色譜儀的 “心臟”，價格不菲。掌握正確的堵塞處理和日常維護方法，不僅能幫您節省寶貴的實驗時間和維修成本，還能保證分析數據的準確可靠。下次再遇到壓力飆升的情況，相信您一定能從容應對，讓您的色譜儀很快恢復高效工作狀態！